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21世紀初考古學家發掘的新石器時代文物表明，伊斯坦布爾所在的半島早在公元前7000紀即有人定居[32]。這一定居點對于新石器革命由近東傳播至歐洲產生十分重要的作用；其存在了近一千年，直至被上漲的水面淹沒[33]。在此考古發現之前，傳統認為色雷斯人，包括弗里吉亞人，在公元前6000紀末開始定居于薩拉基里奧角[19]。亞洲部分，在今卡德柯伊區出土了近公元前4000紀前的文物[34]。這一地點亦是公元前1000紀腓尼基貿易點的所在地，亦是于公元前約680年建立的迦克墩的所在地[a]。

公元前660年[35][a]，來自墨伽拉的希臘殖民者于博斯普魯斯海峽的歐洲一側建立了拜占庭，伊斯坦布爾的歷史被認為在此時才正式開始。殖民者在金角灣色雷斯人定居點附近建起了衛城，推動了新城經濟的發展[36]。拜占庭于前5世紀之交經歷了短暫的波斯統治，但在波希戰爭后希臘人奪回了這座城市[37]。它此后成為雅典同盟及其繼承者雅典第二帝國的一部分，在前355年最終獲得獨立[38]。拜占庭長期為羅馬盟友，而在公元73年正式成為羅馬帝國的一部分[39]。

拜占庭在篡位者佩斯切尼烏斯·奈哲爾與羅馬皇帝塞普蒂米烏斯·塞維魯的戰爭中支持前者，為此付出了慘重的代價；在195年末投降時，兩年的圍城已幾乎將之摧毀[40]。在五年之后，塞維魯開始重建拜占庭，拜占庭也恢復了甚至超越了其過往的榮光

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