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發布時間: | 2023-12-21 04:15 |
最后更新: | 2023-12-21 04:15 |
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蛋白質分子量是蛋白質的一個重要特征參數。質譜法可以用于蛋白質分子量的測量鑒定,質譜結合液相色譜可以用于蛋白混合物分子量的測定。百泰派克生物科技提供基于質譜的蛋白質分子量測定服務。
質譜法測相對分子質量
質譜法測蛋白相對分子質量是利用質譜技術對蛋白質的分子量進行測定。目前,廣泛使用于蛋白質分子量分析的質譜主要有兩種類型:一種是MALDI-TOF,結合了MALDI離子化技術和TOF質譜技術,可以直接對分子量進行測定;另一種是ESI-MS,結合了電噴霧電離ESI和質譜技術,使用高分辨率質譜分析電噴霧得到多電荷信號,對信號進行去卷積分析,獲得j_ī_n_g|q_u_è的分子量數值。這兩種方法各有其優點及適用的領域。MALDI離子化效率非常高,可以對極微量的樣品進行分析。ESI可以產生多電荷峰,可以獲得準確的離子分子質量。更詳細的比較見下圖。
高分辨質譜測分子量
單抗質譜分子量檢測
單抗即單克隆抗體,是指由單克隆細胞產生的抗體。抗體屬于蛋白質,單抗質譜分子量檢測是用質譜技術檢測單抗蛋白質的分子量。同其他蛋白質一樣,單抗分子量可以用MALDI-TOF和ESI-MS等質譜技術進行檢測。基質輔助激光解吸電離(MALDI)與電噴霧電離(ESI)都是在質譜中使用的軟電離技術,與ESI相比MALDI產生的多電荷離子更少,不需要額外的去卷積步驟即可對蛋白樣品進行分析。對于分子量較大的蛋白質,平均質量與準確質量差別很大,大于25kDa分子量的蛋白質類物質分子量鑒定推薦高分辨率質譜ESI-MS鑒定策略。而單克隆抗體主要由兩條輕鏈和兩條重鏈組成,分子量一般約在150kDa左右,單抗分子量檢測一般采用ESI-MS。
混合物的分子量測量
混合物的范圍較為寬泛,這里主要介紹蛋白質混合物的分子量測量。蛋白質混合物包括蛋白質與蛋白質或蛋白質與非蛋白質的混合物。因為質譜檢測對樣品的純度要求較高,特別是在只用一級質譜的時候,用質譜法對蛋白質混合物的分子量進行測量時需要先通過分離技術把混合物分離成為簡單的較純的組分后,再對每一組分中物質的分子量進行測定,在蛋白質分子量測定中,常用的分離技術為高效液相色譜(HPLC)。混合物樣品會經過高效液相色譜分離,分離后的不同組分再進入質譜進行分子量測定。利用液相色譜結合串聯質譜(MS/MS)可以更高效靈敏地檢測混合物蛋白質的分子量。
百泰派克生物科技-您身邊的生物質譜專家
北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 簡稱BTP)從事以生物質譜為依托的生物藥物表征,大分子物質(包括蛋白質、多肽、代謝物)質譜分析以及小分子物質檢測服務。公司采用ISO9001質量控制體系,專業提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務,業務范圍覆蓋蛋白質組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等。7大質量控制檢測平臺,服務3000+企業,10000+客戶的選擇,致力于為您提供y_ō_u|z_h_ì的生物質譜分析服務!