質譜分析蛋白質修飾泛素化

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泛素化修飾（Ubi）是真核生物中常見的蛋白質翻譯后修飾方式，指小分子多肽泛素在相關酶的作用下通過級聯反應以共價鍵連接在底物蛋白或目標蛋白的氨基酸殘基上的過程。

泛素化修飾質譜分析就是利用質譜技術對泛素化修飾進行鑒定，包括泛素化修飾定性鑒定、泛素化位點鑒定以及泛素化水平鑒定等。由于正常生理狀態下泛素化水平較低，在進行質譜鑒定前，有必要對泛素化肽段進行分離富集，以提高泛素化肽段的豐度。利用質譜技術分析泛素化蛋白質的大致流程為先將蛋白質酶解消化為小分子肽段，通過親和色譜等技術對泛素化肽段進行分離富集，再利用質譜儀進行串聯質譜分析，檢測各肽段的分子質量。與發生了泛素化修飾的肽段相比，沒有發生泛素化修飾的肽段分子分子質量剛好增加了泛素分子的相對分子質量，以此作為依據可以對泛素化肽段或蛋白進行鑒定，再將初步鑒定為泛素化的肽段進行二級質譜分析，可以對其進行的驗證。

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