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飛凡檢測: | 動物試驗 |
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所在地: | 江蘇 蘇州 吳江 |
有效期至: | 長期有效 |
發布時間: | 2023-12-17 10:06 |
最后更新: | 2023-12-17 10:06 |
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基因敲入小鼠
基因敲入可以在目的基因位置引入特定的突變或外源基因。比如在目的基因上引入點突變(模擬人類遺傳疾病模型) ;或將報告基因(如EGFP,mRFP,mCherry,mYFP,或LacZ等)通過同源重組的方式引入目的基因的特定位點,從而可以通過報告基因來跟 蹤目標基因的表達。也可以用報告基因取代小鼠本身的基因,使KO/KI發生。
應用
1、用于藥物篩選相關研究;
2、用于信號通路的研究;
3、用于示蹤的相關研究。
基因敲入小鼠
建系原則與流程
1、去除抗性基因 Neo:選擇陽性TurboKnockout KI小鼠與野生型小鼠雜交,獲得去除打靶載體中的 Neo 基因的雜合子F1 代小鼠;
2、再挑選一對雜合子F1 代小鼠進行自交,通過 PCR 鑒定篩選得到去除Neo的F2代純合子KI小鼠。
野生型小鼠雜交
TurboKnockout基因敲除:實現跨越“嵌合體”階段且自刪除Neo,減少兩代繁育時間
基于ES打靶技術的TurboKnockout技術采用了獨特的建系和基因改造技術,建立了具有高效遺傳優勢的TurboKnockout ES細胞系,通過特定胚胎發育階段的顯微注射,使TurboKnockout ES細胞****代替內源ES細胞,從而實現跨越“嵌合體”階段,把ES打靶構建周期縮短至6-8個月。并且TurboKnockout采用獨特的Self-deleting Neo Cassette所獲得的TurboKnockout小鼠與任何品系小鼠交配,都可以****自刪除Neo。也就是說,TurboKnockout不僅實現跨越“嵌合體”階段,還能真正自刪除Neo,從而快速獲得去除Neo的雜合子小鼠。