檢測(cè)技術(shù)服務(wù):Co-IP實(shí)驗(yàn)與Pull-down實(shí)驗(yàn)有什么不同

檢測(cè)技術(shù)服務(wù):Co-IP實(shí)驗(yàn)與Pull-down實(shí)驗(yàn)有什么不同--檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情

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免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法，用于確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用。Pull-down 技術(shù)又稱蛋白質(zhì)體外結(jié)合實(shí)驗(yàn)（Binding assay in vitro）， 是一種行之有效的驗(yàn)證酵母雙雜交系統(tǒng)的體外試驗(yàn)技術(shù)，可用于初步研究?jī)煞N蛋白質(zhì)互作分析。

Co-IP和Pull-down 均可用于檢測(cè)蛋白相互作用，兩者有很多相似之處，包括均能檢測(cè)兩種蛋白質(zhì)之間強(qiáng)相互作用，但均只能進(jìn)行定性分析而不能檢測(cè)瞬時(shí)相互作用，同時(shí)Co-IP和Pull-down在實(shí)驗(yàn)原理及應(yīng)用上也存在一定的區(qū)別。

Co-IP實(shí)驗(yàn)與Pull-down 實(shí)驗(yàn)有什么不同呢？Co-IP可用于測(cè)定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合，以及確定某種特定蛋白質(zhì)的新的相互作用蛋白，其實(shí)驗(yàn)條件處于天然狀態(tài)下，因此可以反映出較為真實(shí)的蛋白質(zhì)之間的相互作用。由于Co-IP沉淀下來(lái)的是蛋白復(fù)合物，在純化蛋白質(zhì)復(fù)合物時(shí)，非特異性的粘附蛋白是不可避免的，所以不能直觀的顯示蛋白質(zhì)之間的相互作用是直接還是間接的。

Pull-down在體外驗(yàn)證兩種蛋白之間是否有相互作用，其可以去除其它蛋白的影響，可以明確目的蛋白和待檢測(cè)蛋白是否直接發(fā)生相互作用。由于Pull-down實(shí)驗(yàn)條件是體外狀態(tài)而非體內(nèi)自然狀態(tài)，無(wú)法得知體內(nèi)真實(shí)的蛋白結(jié)合情況，因而可能會(huì)使實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性，例如可能是因?yàn)殡姾勺饔玫挠绊懺斐傻奈蕉皇巧硇缘南嗷プ饔谩Ｍ瑫r(shí)，Pull-down也可以對(duì)Co-IP實(shí)驗(yàn)鑒定到的蛋白相互作用關(guān)系做進(jìn)一步驗(yàn)證。若將Co-IP/Pull-down技術(shù)與以LC-MS為基礎(chǔ)的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)結(jié)合，通過(guò)一次實(shí)驗(yàn)便能高通量的鑒定和篩選到多個(gè)與待研究的目的蛋白存在相互作用的蛋白質(zhì)（蛋白質(zhì)復(fù)合物組分）。

百泰派克生物科技基于專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)以及豐富的服務(wù)經(jīng)驗(yàn)為廣大科研人員提供GST融合蛋白Pull-down蛋白互作分析，后續(xù)基于高分辨率液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)（LC-MS/MS）可對(duì)Co-IP樣品及GST融合蛋白Pull-down等純化樣本中的蛋白/蛋白混合物進(jìn)行質(zhì)譜鑒定。您只需將您的需求告訴我們并寄送樣品，我們會(huì)負(fù)責(zé)項(xiàng)目后續(xù)所有事宜，包括樣品前處理、Co-IP/Pull-down、質(zhì)譜分析、質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)分析。

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